с 9:00 до 21:00
Яйцеклетки из криобанка могут быть разморожены и оплодотворены в любой необходимый момент
Получение яйцеклеток. Половые клетки (ооциты) берут у донора, прошедшего полное предварительное обследование (Приказ МЗ РФ №803н от 30.07.2021) после гормональной стимуляции яичников. Под наблюдение УЗИ врач следит за процессом роста фолликулов (размер фолликула говорит о зрелости ооцита), проводит пункцию фолликулов и получает донорский материал.
Выделение и очищение яйцеклеток. Эмбриолог проверяет под стереомикроскопом фолликулярную жидкость, полученную в результате пункции фолликула и отделяет ооцит-кумулюсный-комплекс (ОКК) – ооцит, окруженный кумулюсом. Далее, эмбриолог переносит все ОКК, полученные в результате пункции, в чистую культуральную среду, и ставит ооциты в инкубатор на 37 °С. Через 30-40 минут ОКК проводят через гиалуронидазу, чтобы очистить ооциты от клеток кумулюса и проверить ооциты на зрелость.
Оценка зрелости яйцеклеток. После очистки эмбриолог визуально под микроскопом оценивает зрелость полученных ооцитов и возможность их использования в программе ЭКО. Зрелыми ооцитами считаются ооциты, достигшие в результате созревания стадии метафазы 2 (M II). На этой стадии ооцит способен к оплодотворению. Замораживают только зрелые донорские ооциты (МII). Ооциты донора на стадии МI и GV не пригодны для замораживания и дальнейшего использования.
Защита яйцеклеток. Перед заморозкой донорские ооциты помещают в специальный раствор-криопротектор, предупреждающий негативное воздействие низких температур. Криопротектор вытесняет воду из цитоплазмы, в результате чего не происходит кристаллизация и разрушение клеток.
Замораживание яйцеклеток. В соответствии со стандартным протоколом производителя сред для витрификации после раствора-криопротектора ооциты под микроскопом по несколько штук переносят на крионоситель («криотоп», «криотек» и др.) и помещают в жидкий азот при температуре -196 °С.
Хранение яйцеклеток. Каждый крионоситель имеет этикетку с указанием №ДО, количества ооцитов на носителе и даты заморозки. Крионосители с донорскими клетками хранят в специальных контейнерах (криопеналах) в криохранилище в парах азота или в жидком азоте под постоянным контролем условий хранения.
Размораживание яйцеклеток. После разморозки половые клетки сохраняют свои свойства и могут использоваться в программе ЭКО. Для размороженных ооцитов можно использовать только ИКСИ в качестве метода оплодотворения, так как для замораживания был удален кумулюс.